农业生物技术系列--现代生物技术与畜禽疾病防治

近年来，禽流感、口蹄疫和疯牛病等一系列畜禽传染病的暴发流行给全球社会和经济造成了巨大损失，直接威胁着食品安全和人类健康。为了弄清这些动物疾病的发生规律和防治方法，逐步控制和消灭这些动物疾病，各国在研究重大动物疫病的病原、流行病学、致病机理、诊断方法，新型疫苗的研制与免疫保护等领域投入了巨大的人力和物力，并取得了显著的进展，积累了丰富的经验。

与此同时，食品的生物安全已被提到重要议事日程，提倡绿色食品、限制抗生素的使用、加强食品中药物残留检测等，使传统的防治畜禽疾病的方法面临新问题和挑战，从而促进了新型、高效、安全的生物药品的研究与开发，并应用于动物疫病的防治。

高新技术，尤其是现代生物技术的应用推动了畜禽疾病防治领域许多研究的发展，如：细菌人工染色体技术在疱疹病毒结构与功能研究中的应用；反向遗传技术在研究禽流感病毒毒力基因和新型疫苗中的应用；假病毒技术在病毒进入细胞的机制的研究中的应用。重组伪狂犬病毒疫苗、重组腺病毒载体疫苗及重组马立克病毒疫苗的研究在新型基因工程活载体疫苗的研究中具有代表性，是新型动物疫苗的发展方向。重组动物干扰素与抗菌肽等新型生物制剂有望在提高动物免疫力、减少畜产品抗生素的残留以及控制耐药细菌的产生等方面发挥作用。应用基因工程技术建立的一些鉴别诊断方法能够区分野毒感染和疫苗接种，在动物疫病的根除计划中将发挥重大的作用。

本着“发展高科技、实现产业化”的战略思想，我们总结了近年来在动物传染病学研究中的一些新的研究方法和原理，以及新型重组疫苗、基因工程药物的研究现状、存在问题和展望，编著成书。真诚希望本书能在动物传染病防治高新技术研究方面起到抛砖引玉的作用。但因知识和能力所限，尽管尽了最大的努力，本书仍会存在不妥或错误之处。敬请广大专家和读者批评指正。

本书是一部比较完整、详细论述现代生物技术在畜禽防治领域应用的著作。文中不仅参考借鉴了目前国内外的最新研究成果，更以较大篇幅介绍了作者本人所在实验室多年来在这一领域所取得的成果和积累的丰富经验。书中围绕畜禽传染病防治中的一些最新生物技术研究方法、基因工程疫苗和重组生物药物的开发、分子诊断技术的研究与应用展开论述，主要内容包括研究病原结构与功能的细菌人工染色体技术、反向遗传学技术和假病毒技术；重组伪狂犬病毒疫苗、重组禽痘疫苗和重组马立克病毒疫苗等病毒活载体苗的研制；以及重组动物干扰素、基因工程抗菌肽等新型高效生物药物的研制方法和功能活性介绍。

本书可作为高校动物医学专业教师、研究生和高年级本科生的教材或教学参考书使用，也可为从事动物传染病学、生物制品学以及生物技术研究的广大科研人员和技术人员提供参考。

第一章细菌人工染色体技术及其在动物病毒研究中的应用

第一节概述

一、细菌人工染色体的构建及其发展

二、Cre/LoxP位点特异性重组系统

三、细菌人工染色体的应用

第二节伪狂犬病病毒细菌人工染色体及其应用

一、伪狂犬病毒

二、伪狂犬病病毒细菌人工染色体的构建

三、伪狂犬病病毒细菌人工染色体的应用

第三节马立克病毒细菌人工染色体

一、基本原理

二、应用

三、展望

参考文献

第二章假病毒技术及其应用

第一节概述

第二节假病毒技术的相关知识

一、表型及表型混合

二、反转录病毒的结构及特性

第三节假病毒技术的原理及其应用

一、假病毒构建的原理

二、假病毒构建的方法

三、假病毒技术的优缺点

四、假病毒技术构建的一般程序

五、假病毒构建的注意事项

第四节几种常用的假病毒构建体系

一、鼠类白血病病毒假病毒构建体系

二、人类免疫缺陷病毒假病毒构建体系

第五节假病毒技术在禽流感病毒研究中的应用

一、禽流感概述

二、血凝素

三、禽流感病毒假病毒体系的构建

第三章反向遗传技术与动物传染病的防制

第一节概述

第二节反向遗传技术的基本原理和发展概况

一、反向遗传技术的基本原理

二、反向遗传技术的发展

第三节反向遗传技术的技术路线和要点

一、反向遗传技术的技术路线

二、反向遗传技术的要点

第四节反向遗传技术在几个重要动物疫病防制中的应用前景

一、病毒基因结构与功能的研究

二、新型疫苗的研究

三、开发新型病毒载体

参考文献

第四章禽痘病毒载体疫苗及其在动物生产中的应用

第一节概述

第二节禽痘病毒的分子生物学特性及其作为痘苗载体的优势

一、禽痘病毒

二、禽痘病毒表达载体的优点

第三节重组禽痘病毒的构建

一、重组禽痘病毒的构建步骤

二、外源基因的表达调控结构

三、重组病毒的筛选

四、构建重组病毒时应注意的事项

第四节重组禽痘疫苗在几种常见禽病防制中的应用

一、传染性法氏囊病重组疫苗

二、鸡新城疫重组疫苗

三、传染性支气管炎重组疫苗

四、传染性喉气管炎病重组疫苗

五、禽流感重组疫苗

六、马立克病重组疫苗

第五节重组禽痘病毒疫苗的安全性及前景展望

一、安全性

二、应用前景

三、存在问题

参考文献

第五章腺病毒和腺病毒载体的研究及应用

第一节腺病毒及其特征

一、概述

二、腺病毒的基本特征

第二节腺病毒载体及其应用

一、腺病毒载体的优点及改造策略

二、腺病毒载体的应用

参考文献

第六章重组马立克病疫苗

第一节马立克病毒载体

一、概述

二、马立克病毒生长的非必需区

第二节预防禽病的重组马立克病毒疫苗

一、新城疫

二、传染性法氏囊病

三、结语

参考文献

第七章重组伪狂犬病疫苗研究

第一节伪狂犬病概述

第二节伪狂犬病基因工程亚单位疫苗

第三节伪狂犬病核酸疫苗

第四节重组伪狂犬病毒疫苗

一、以腺病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗

二、以痘苗病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗

三、以猪痘病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗

四、以其他疱疹病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗

五、以伪狂犬病毒为载体的重组伪狂犬病毒疫苗

第五节基因工程缺失疫苗

一、自然弱毒疫苗

二、缺失疫苗

三、插入报告基因的基因缺失疫苗

四、伪狂犬病毒基因缺失疫苗的优势

第六节基因工程活载体疫苗

第七节小结与展望

第八章动物干扰素的研究及应用

第一节干扰素概述

一、干扰素基因及其蛋白质

二、干扰素诱生剂

三、干扰素的生物学功能

四、干扰素生物工程

五、干扰素的应用

参考文献

第二节基因工程猪干扰素的研究

一、猪干扰素的分类及其产生细胞

二、猪干扰素的基因工程研究

三、猪干扰素的抗病毒作用研究

四、重组猪干扰素免疫调节活性的研究

五、猪体内病原特异的γ干扰素水平与机体抗病毒免疫保护的相关性

研究

六、结语

参考文献

第三节鸡干扰素的研究与生产应用

一、鸡干扰素研究概况

二、国内重组鸡干扰素的最新研究进展

三、鸡的基因工程干扰素在临床使用时需了解的事项

四、重组鸡干扰素的应用前景

第四节基因工程犬α干扰素

一、犬α干扰素研究现状

二、笔者实验室的工作

第九章抗菌肽及其应用

第一节抗生素问题及抗菌肽概况

第二节抗菌肽的特性

一、抗菌肽与传统抗生素的差异

二、抗菌肽的结构特点

三、抗菌肽的作用机制

四、抗菌肽结构与功能的关系

五、胞膜结构对抗菌肽活性的影响

第三节抗菌肽的来源与分布

一、哺乳动物抗菌肽

二、两栖类动物抗菌肽

三、昆虫抗菌肽

四、海洋生物抗菌肽

五、植物抗菌肽

第四节抗菌肽的基因工程研究现状

第五节抗菌肽目的基因的获得及相关技术

一、重叠区扩增基因拼接法

二、降落PCR

三、正义链和反义链的磷酸化、退火

第六节抗菌肽表达策略

一、抗菌肽原核表达策略

二、抗菌肽真核表达策略

三、抗菌肽基因工程表达产物的检测

第七节抗菌肽的应用及其前景

一、抗菌肽在转基因工程中的应用

二、抗菌肽在医药生产中的应用

三、抗菌肽在食品防腐剂中的应用

四、抗菌肽在饲料添加剂中的应用

第十章动物疫病诊断新技术

一、基因工程表达产物在动物疫病诊断中的应用

二、实时荧光定量PCR技术

三、实时PCR检测技术